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2023-03-26 13:12
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一些女性在准备怀孕前都会到医院进行相关检查,结果没想到却查出“白带清洁度3度”,按照医学教科书的定义就是“阴道炎”了,于是许多人便开始了吃抗生素、阴道冲洗等一系列消炎对症治疗。那么白带清洁度3是怎么引起的?

清洁度3度就是炎症?

据了解,一般的白带检查主要包括:清洁度、淋球菌、滴虫、真菌、线索细胞等,清洁度1-2度认为属于正常,3度认为属于炎症,如果其他几种检查结果出现阳性,一般清洁度就是4度,医生大体会按照这样的结果来判断是否为阴道炎。

但在临床实践中,他们却不会轻易下这样的诊断,因为对于白带的清洁度来说,除了炎症可以增加其度数外,其他因素也会起作用。

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白带清洁度临床意义

中医认为心情、饮食、性生活等会影响白带的性状质地,也会影响成年女性白带检查显示的清洁度。所以熬夜、生活起居不正常、饮食偏向肥腻酸甜的,也会引起白带清洁度3度。

白带清洁度3的临床表现

性状,透明黏性白带且量多,见于慢性病,如肺结核、贫血及体质瘦弱妇女。灰白或灰黄色、黏度低,常见于细菌性阴道炎。黄色或黄绿色、黏度低,常见于滴虫性阴道炎。黄色水样,常见于子宫黏膜下肌瘤、宫颈癌、子宫体癌、输卵管癌等。

脓性,常见于滴虫性阴道炎、慢性宫颈炎、老年性阴炎、子宫内膜炎、官腔积液、阴道异物等。豆腐渣样,为真菌性阴道炎所持有。血性,应警惕恶性肿瘤的可能,如宫颈癌、宫体癌等。

白带异常的临床症状

白带异常,引起女性生殖道炎症的病原体不外乎两大来源,即来自原本寄生于阴道内的菌群,或来自外界入侵的病原体。

正常情况下,阴道内以阴道杆菌占优势,还有少量厌氧菌、支原体及念珠菌,这些菌群形成一种正常的生态平衡。但是,当人体免疫力低下、内分泌激素发生变化,或外来因素如组织损伤、性交,破坏了阴道的生态平衡时,这些常住的菌群会变成致病菌,冲破阴道屏障而引起感染。

无症状可默认为正常

虽然常规的白带检查清洁度3度可以认为属于炎症范围,但是只要没有其他的不舒服症状(如阴部痛或痒、灼热、小便急频痛、白带有臭味等),也没有查到传染病病原体(如衣原体、淋球菌等),可以默认为正常,不需要治疗。

白带常规检查清洁度的临床意义

但是如果清洁度是3度,同时有不舒服的症状出现,就需要治疗,但也是局部用药即可,除非有很特别的病原体感染才需要用到口服抗生素。

导语

古有女娲造人术,那时候的人,是童话故事中的神女之子。

今有“试管婴儿”胚胎术,这时候的人,是现代医术之子。

“试管婴儿”是指由体外受精及胚胎移植术产生的婴儿,换句话说,体外人体形成,体内人体成长。

那么,32年过去了,我国首例“试管婴儿”已经生子,她现在怎么样了呢?

一、中国首例试管婴儿

世界上第一个试管婴儿名叫路易丝·布朗,于1978年7月25日23时47分在英国诞生,随后,这一技术迅速普及到了很多国家,中国亦是如此。

但是并没有在中国广泛普及,一方面是因为费用高昂,一个周期就要花费达到2万到3万元。二是因为新兴技术的发展,总要经历一个适应阶段,没有人敢贸然尝试。

作为第一个吃螃蟹的人,郑桂珍和丈夫敢于人先,作为不孕母亲,一个孩子对他们来说真的是天使,他们只能相信这次会带来好运。

于是,他们找到了北医三院教授张丽珠,虽然医疗条件不如现在,但是经过多次努力,郑桂珍总算是怀上了“试管婴儿”。

二、婴儿出生

婴儿出生之前,舆论大概分成了两派,一派希望她能成功,这样可以打破不孕之门,让中国万千不孕女性能拥有自己的孩子,拯救因不孕而离散的家庭。

另一派一方面担心成功率低,另一方面还担心伦理问题,代孕母亲与遗传基因的母亲,二者难以分别。

幸运的是,1988年3月10日,郑桂珍成功生下一个女儿。孩子心脏十分有力,这让郑桂珍一家和医生都沉浸在新生命诞生之喜中。

孩子取名为郑萌珠,这个名字寓意深刻,萌代表萌芽的意思,珠取自接生医生张丽珠的珠,再冠以父姓郑。

三、婴儿成长

一个名字包含了三种含义,一是试管婴儿临床成功运用的种子在萌芽,二是张丽珠开启了中国试管婴儿的先河,三是父母对孩子的爱。

郑萌珠出生时是3.9公斤,体重属于正常婴儿标准,8个月时,她就学会了叫爸爸妈妈,一岁时,就能咿呀学语,甚至唱歌。

郑萌珠成长很快,几乎没有停顿,身体也十分健康,很少生病,在性格方面,她很像一只顽皮鼠,十分活泼开朗。

2009年,郑萌珠考上西安西京学院,毕业后,她找到当初出生的那家医院——北医三医院,做了一名病案管理人员。

四、现状

如今的郑萌珠,和正常人一样,遇到了自己的爱情,已经结婚了,生活十分美满幸福。

巧合的是,她怀孕后,选择了她出生的医院进行产子。2019年4月15日早上8时34分,她在北医三医院成功生下了一个男孩。

这个孩子是中国首例试管婴儿二代的孩子,他十分健康,没有丝毫后遗症。

中国首例试管婴儿的成功,离不开技术,也离不开医生的努力,离不开人民的信任。

你身边有试管婴成功的例子吗?欢迎评论。

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ELISA样本制备指南及注意事项

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定义及介绍

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ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附测定)是最基础的免疫学实验之一,其理论基础是抗原抗体的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本,实验操作步骤并不繁琐,但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值,从而供下一步分析所用,因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。



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样本制备指南


1

血清

全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20min,取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血,高血脂样品


2.血浆

抗凝剂推荐使用EDTA-Na

2

,样品采集后30min内于2-8℃,1000×g离心15min,取上清即可检测。

3组织匀浆/组织全蛋白

用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃,5000×g离心5-10min,取上清检测。

其余方法:在分析天平(AL204型)上,称量50-100mg组织样本。在样本中加入5倍质量体积的含1%PMSF的1×PBS缓冲液;并用小剪刀等工具将组织样本剪碎(尽可能小块)。注:1×PBS缓冲液使用前,需加入PMSF,现用现加,PMSF终浓度为1mM。打开超声破碎仪,将超声破碎仪的功率调至25%,超声时间2s,间隔时间5s,总时间2min。放入样本,冰上超声3min。视样本匀浆情况调整总时长。超声完成后,将样本放于4℃或冰上裂解30min。打开离心机,将转速调至12000×g;将样本放入离心机,离心10min,取上清,按需要分装,于-20℃贮存。注:留取20μL样本,用于后续BCA法测定样本蛋白含量。

组织匀浆液或组织全蛋白中的蛋白浓度对于检测实验的影响至关重要,建议样本蛋白浓度至少1mg/mL以上,较低浓度蛋白的组织匀浆液有可能导致ELISA检测失败。


4.细胞提取液

贴壁细胞

用冷的PBS轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g离心5min后收集细胞;

悬浮细胞

可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每10

6

个细胞中加入150-200μLPBS重悬(推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂;若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃,1500×g离心10min,取上清检测。注:留取20μL样本,用于后续BCA测定。

其余方法:

对于

贴壁细胞

:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。以2百万细胞为例,在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液,震荡混匀细胞,4℃或冰上裂解30min。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。必要时可以进行超声处理,超声步骤与组织样本相同。

对于

悬浮细胞

:离心收集细胞,以2×10

6

细胞为例,在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液,震荡混匀细胞,4℃或冰上裂解30min。用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成(5-10)×10

5

细胞/管,然后再裂解。必要时可以进行超声处理,超声步骤与组织样本相同。注:1×PBS缓冲液使用前,需加入PMSF,现用现加,PMSF终浓度为1mM。打开离心机,将转速调至12000×g;将样本放入离心机,离心10min,取上清,按需要分装,于-20℃贮存。注:留取20μL样本,用于后续BCA法测定样本蛋白含量。



5.细胞培养上清或其他生物体液

收集液体后于2-8℃,1000×g离心20min,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。注:因细胞培养基中的胎牛血清影响或其他生物体液中杂蛋白的影响,不建议进行BCA法测定样本蛋白含量。

实验细节与注意事项

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1


收集血液应避免产生溶血现象。红细胞破碎,释放大量的过氧化物酶,会影响ELISA检测中的辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)的酶促反应,造成检测结果的不确定性。

0

2



样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。

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3


试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围,建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果样品中待测物浓度过高或过低,请对样本做适当的稀释或浓缩。

04


检测样本的稀释推荐多步稀释法,常规稀释检测为血清/血浆检测稀释度为2倍、20倍、200倍;细胞上清稀释度为5倍、50倍、500倍;建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度。

对于稀释倍数比较大的检测样本,参考稀释方案如下:

稀释100倍:一步稀释。取5μL样本到495μL标准品/样本稀释液内,做100倍稀释;

稀释1000倍:两步稀释。取5μL样本到95μL标准品/样本稀释液内,做20倍稀释,再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释1000倍;

稀释100000倍:三步稀释。取5μL样本到195μL标准品/样本稀释液内,做40倍稀释,再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内,做50倍稀释,最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释100000倍;

每步稀释时取液量不少于3μL,稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀,避免起泡。


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若所检样本不在说明书所列样本之中,建议做预实验验证其检测有效性。

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若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液,由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。

07


某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。

08



对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本,经BCA法测定样本蛋白含量后,建议进行蛋白浓度的统一化,避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差;例如,统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL,进行后续的稀释和检测。


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